智能集菌儀無菌檢驗(yàn)操作規(guī)程

1、目的 通過無菌檢驗(yàn)，確保滅菌后產(chǎn)品能夠達(dá)到無菌的要求。 

2、適用范圍  適用于滅菌后醫(yī)療器械產(chǎn)品（列舉）的無菌檢驗(yàn)。

3、檢驗(yàn)依據(jù)  本廠產(chǎn)品注冊標(biāo)準(zhǔn)（編號） EN1174-1996醫(yī)療器械滅菌產(chǎn)品中微生物數(shù)量的評估 《中國藥典》（2005年版）  GB14233.2-2005醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第二部分：生物試驗(yàn)方 GB15980-1995一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) 

4、儀器、設(shè)備  百級層流超凈工作臺、電熱干燥箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、壓力蒸汽滅菌器、集菌儀（器）、電子天平、PH計(jì)、冰箱、恒溫水浴鍋、酒精燈、三角燒瓶，接種環(huán)、無菌棉簽、鑷子，試管架，大試管若干等。

5、無菌檢驗(yàn)室的環(huán)境要求  

5.1智能集菌儀無菌檢驗(yàn)應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級下的局部百級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。  

5.2緩沖區(qū)與外界環(huán)境、無菌檢驗(yàn)室與緩沖區(qū)之間空氣應(yīng)保持正壓，陽性對照室與緩沖區(qū)之間空氣應(yīng)保持負(fù)壓。無菌檢驗(yàn)室與室外大氣之間靜壓差應(yīng)大于10Pa。無菌檢驗(yàn)室的室溫應(yīng)保持18～26℃，相對濕度：45～65%。  

5.3無菌檢驗(yàn)室的單向流空氣區(qū)、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的監(jiān)測。每年至少檢測一次。  

5.4無菌檢驗(yàn)過程中應(yīng)同時檢查超凈工作臺單向流空氣中的菌落數(shù)：智能集菌儀每次操作時在層流空氣所及臺面的左中右置3個營養(yǎng)瓊脂平板，暴露30min，于30～35℃培養(yǎng)48小時，菌落數(shù)平均應(yīng)不超過1CFU/平板。 

6、無菌檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備 

6.1器具滅菌、消毒  

6.1.1滅菌：試驗(yàn)過程中與供試品接觸的所有器具必須采用可靠方法滅菌。可經(jīng)電熱干燥箱160℃以上干烤2小時，或置壓力蒸汽滅菌器內(nèi)121℃蒸汽滅菌30分鐘后使用（根據(jù)滅菌效果驗(yàn)證決定滅菌參數(shù)）。

所有的滅菌物品不應(yīng)超過2周即用畢，否則應(yīng)重新滅菌。  

6.1.2消毒：凡檢驗(yàn)中使用的器材無法滅菌處理的，使用前必須經(jīng)消毒處理。如無菌檢驗(yàn)室的試管架、電子天平、工作臺面、工作人員的手、橡膠吸頭等。可采用消毒劑浸泡或擦拭。消毒劑應(yīng)每月更換，以防止產(chǎn)生耐藥菌株。  

6.1.3標(biāo)識：器具的滅菌、消毒后必須做好標(biāo)識，標(biāo)明滅菌、消毒時間和使用有效期。 

6.2人員、物料進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室  

6.2.1開啟紫外線燈或臭氧發(fā)生器進(jìn)行空間滅菌處理，消毒時間不得少于30min。  

6.2.2物料進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室流程  

6.2.2.1脫包：進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室的物品若有雙重包裝的，需將外包裝在傳遞窗/緩沖間拆除后，傳入試驗(yàn)室。  

6.2.2.2消毒：進(jìn)入無菌操作室的所有培養(yǎng)基、供試品等的外表都應(yīng)采用適用的方法進(jìn)行消毒處理，以避免將外包裝污染的微生物帶入無菌檢驗(yàn)室。  

6.2.2.3傳遞：查看所有進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室的器具上的滅菌、消毒標(biāo)識，是否在有效期內(nèi)。符合要求的經(jīng)傳遞窗傳入無菌檢驗(yàn)室。  

6.2.3人員進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室流程  

6.2.3.1更鞋脫衣：在一更區(qū)脫去一般區(qū)工作鞋，穿上無菌檢驗(yàn)室工作鞋；脫去一般區(qū)工作服。  

6.2.3.2洗手：首先用肥皂或洗手液在手上揉擦出泡沫，再用流水連續(xù)沖洗20秒，洗凈泡沫。 

6.2.3.3更衣：在二更區(qū)按照從上到下的順序穿戴無菌工作服（包括衣、帽、口罩等），要求褲子掖在上衣里，口罩掩住口鼻，帽子包裹所有頭發(fā)。  

6.2.3.4手消毒：用消毒液浸泡雙手5秒以上或用浸過消毒液的棉球擦拭雙手。消毒液可用洗必泰、新潔爾滅、碘伏、75%酒精等。  

6.2.3.5人員進(jìn)入：經(jīng)緩沖間進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室。 

6.2.4人員進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室后，進(jìn)一步用消毒液擦拭工作臺面，戴無菌手套。

7、無菌檢驗(yàn)操作要求  

7.1全過程必須嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，防止微生物污染。 

7.2使用玻璃器皿應(yīng)輕取輕放，避免破損，以防培養(yǎng)物擴(kuò)散。 

7.3所有操作均應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行，且不得有大幅度或快速動作，以免攪動空氣中的塵埃微粒。  

7.4使用金屬接種器具時，用前、用后均需灼燒滅菌。  

7.5在接種培養(yǎng)物時，動作應(yīng)輕、準(zhǔn)，防止培養(yǎng)物濺出，產(chǎn)生汽溶膠，造成污染。